操作流程：
1、您收到母細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置3-4小時以穩定細胞狀態，然后換用新鮮完全培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml完全培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，*后放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）待細胞完全貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至含5ml完全培養基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀用5ml完全培養基重懸，接種25cm2培養瓶，于37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）換用新鮮完全培養基繼續培養。
服務流程：
（1）客戶提供：目的細胞具體信息；
（2）操作過程：細胞復蘇培養，細胞發貨；
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產品名稱 |
甲狀腺癌細胞FRO |
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規格 |
詳見說明書 |
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貨號 |
BH-0110406 |
英文簡稱：FRO細胞
產品名稱：甲狀腺癌細胞FRO
規格：T25
形態特性：上皮樣
生長特性：貼壁生長
特征特性：人甲狀腺未分化癌細胞（anaplastic thyroid carcinoma, ATC），未分化，每支細胞量1×106 。每個批次均通過本庫支原體檢測，結果為陰性。 該細胞株經過STR鑒定，與國際上ATCC、DSMZ、JCRB和RIKEN 公布的STR數據庫中8000余種細胞均不相符，排除被常見細胞系污染的可能。由于FRO細胞本身沒有公布可比對的STR圖譜數據，我們只能初步判斷該細胞可能為渀攀??????攙椀漀氀?樀瀀*
培養操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片完全浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。
實驗要點及說明 ：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置數小時（4h左右），穩定細胞狀態，切忌在溫箱內靜置過夜。
3. 靜置后鏡檢，拍照，記錄細胞狀態。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。
4. 貼壁細胞：若細胞密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，收集細胞瓶內的培養基，留8ml繼續培養至80%左右再傳代，瓶蓋可稍微擰松。
5. 細胞瓶內的培養基含血清和雙抗，可收集后4℃保存備用，可補加2%血清。剛開始傳代時建議一半用細胞瓶內的培養基，一半用客戶自備的培養基，使細胞逐漸適應培養條件，以免因不適應而造成生長狀態不佳。
6. 細胞胰酶消化液建議使用PBS配制，
7. 因為細胞培養過程外因太多，所以我們的售后保障期為一周，超過一周的細胞我們會酌情處理，但不提供免費更換服務。 細胞運輸和保存：可選擇干冰運輸及發送復蘇存方式：（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇；收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
鮭魚精DNA溶液DNA solution from salmon testes (10MG/...9007-49-21ML
鯡魚精DNADeoxyribonucleic acid from herring spermNull1G
小牛胸腺DNADeoxyribonucleic acid sodium salt from...73049-39-550MG
dNTPsDeoxynucleotide Mix (10 mM, ≥99%)Null0.5ML
胞嘧啶Cytosine (≥99.0%)71-30-75G
5-溴-2'-脫氧脲苷5-Bromo-2′-deoxyuridine (5-BrdU, ≥99%)59-14-3100MG
6-芐氨基嘌呤6-Benzylaminopurine (6-BA, ≥99%)1214-39-71G
氨基喋呤 (培養級)Aminopterin (≥98%, cell culture tested)54-62-610MG
氨甲喋呤Methotrexate (≥98%, meets USP testing)2167225MG
5'-三磷酸腺苷 (常規)Adenosine 5′-triphosphate (ATP-Na2, ...987-65-51G
5'-三磷酸腺苷 (超...Adenosine 5′-triphosphate (ATP-Na2, S...987-65-51G
5'-單磷酸腺苷Adenosine 5′-monophosphate (AMP, ≥97%)18422-05-45G
甲狀腺癌細胞FROngyloides equinus馬類圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周
Human Papillomavirus 52(HPV-52)人瘤病毒52 LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周
Herba epimedii淫羊藿探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
Plasmodium falciparum鐮刀瘧原蟲(惡性瘧原蟲)LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周
Davainea proglottina節片代凡絳蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周
Gardnerella vaginalis加德納LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周
Staphylococcus epidermidis表皮葡萄球探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周
Ditylenchus angustus水稻莖線蟲PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周
Nodus nelumbinis rhizomatis藕節探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周
Clostridium estertheticum酯化梭狀芽孢桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周
Streptococcus uberis**鏈球熒光及可視化LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周
Vibrio tapetis蛤弧LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周
Radix rhapontici漏蘆探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周